Hướng dẫn sử dụng bộ ELISA Monkey Collagenase I (Collagenase I)

Công ty chuyên cung cấp kit Elisa, đảm bảo chất lượng, giá ưu đãi, có thể cung cấp dịch vụ xét nghiệm miễn phí, vui lòng gọi điện để tư vấn!

Bộ này chỉ có thể được sử dụng cho nghiên cứu khoa học, không được sử dụng để chẩn đoán y tế.

Bộ phát hiện định lượng Monkey Collagenase I (Collagenase I) (ELISA)

hướng dẫn sử dụng

[Tên bộ ELISA Monkey Collagenase I]

Bộ phát hiện định lượng Monkey Collagenase I (Collagenase I) (ELISA)

【Cách sử dụng bộ Kit ELISA Monkey Collagenase I】

Phát hiện định lượng huyết thanh, huyết tương và các chất lỏng liên quan.

[Nguyên tắc phát hiện bộ ELISA của Monkey Collagenase I (Collagenase I)]

Bộ sản phẩm này sử dụng xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzyme bánh sandwich hai bước kháng thể kép (ELISA). Thêm chất chuẩn và mẫu thử vào tấm phủ nhãn enzyme kháng thể đơn dòng collagenase I (Collagenase I) được phủ sẵn. Sau khi ủ đủ thời gian, rửa để loại bỏ các thành phần không liên kết, sau đó thêm dung dịch làm việc nhãn enzyme. Sau thời gian ủ đủ, rửa để loại bỏ các thành phần không liên kết. Chất nền A và B được thêm vào theo thứ tự và chất nền (TMB) được chuyển thành sản phẩm màu xanh lam được xúc tác bởi peroxidase cải ngựa (HRP), chất này chuyển sang màu vàng dưới tác dụng của axit. Nồng độ (Collagenase I) có mối tương quan dương. Giá trị OD được đo ở bước sóng 450 nm. Dựa trên giá trị OD của chất chuẩn và mẫu, hàm lượng khỉ collagenase I (Collagenase I) trong mẫu đã được tính toán.

[Thành phần của Bộ kit ELISA Monkey Collagenase I]

1

Tấm phủ enzyme

12 lỗ × 8

7

Nhà phát triển A chất lỏng

6mL

2

Tiêu chuẩn

0,3mL × 6 ống

8

Chất lỏng phát triển B

6mL

3

Nước giặt đậm đặc gấp 20 lần

25mL

9

Dừng giải pháp

6mL

4

chất pha loãng mẫu

6mL

10

Hướng dẫn

1 phần ăn

5

chất pha loãng đặc biệt

6mL

11

Phim niêm phong

2 tờ

6

Thuốc thử enzym

6mL

12

túi kín

1

[Thuốc thử và thiết bị không được yêu cầu trong bộ ELISA Monkeynase I (Collagenase I)]

1. Bộ điều nhiệt 37oC

2. Đầu đọc vi mạch thông số kỹ thuật tiêu chuẩn

3. Pipet chính xác và đầu tip dùng một lần

4. Nước cất

5. Ống nghiệm dùng một lần

6. Giấy thấm

【Các bước của Monkey Collagenase I ELISA Kit】

1. Chuẩn bị: Lấy bộ thuốc thử ra khỏi tủ lạnh và cân bằng lại ở nhiệt độ phòng trong 30 phút.

2. Dung dịch pha: pha loãng dung dịch rửa đậm đặc 20 lần với nước cất thành dung dịch ban đầu.

3. Thêm sản phẩm chuẩn và mẫu cần kiểm tra: lấy đủ số lượng tấm phủ enzym và cố định vào khung. Lập các giếng tiêu chuẩn, các giếng mẫu cần xét nghiệm và các giếng đối chứng trống, ghi lại vị trí của từng giếng trong các giếng tiêu chuẩn. Thêm 50μL sản phẩm tiêu chuẩn; đầu tiên thêm 10μL mẫu cần kiểm tra, sau đó thêm 40μL chất pha loãng mẫu (nghĩa là mẫu được pha loãng 5 lần); giếng kiểm soát trống không được thêm vào.

4. Ủ: Ủ trong nồi cách thủy 37°C hoặc máy điều nhiệt trong 30 phút.

5. Rửa sạch tấm: loại bỏ chất lỏng, thấm khô trên giấy thấm, đổ đầy dung dịch rửa vào từng lỗ, để yên trong 1 phút, giũ sạch dung dịch rửa, lau khô trên giấy thấm, lặp lại quá trình rửa 4 lần (bạn cũng có thể sử dụng máy giặt để nhấn Hướng dẫn giặt bảng).

6. Thêm dung dịch làm việc có nhãn enzyme: thêm 50μL dung dịch làm việc có nhãn enzyme vào từng giếng mà không cần thêm giếng đối chứng trống.

7. Ủ: Ủ trong nồi cách thủy 37°C hoặc máy điều nhiệt trong 30 phút.

8. Rửa sạch tấm: đổ bỏ chất lỏng, thấm khô trên giấy thấm, đổ nước giặt vào từng lỗ, để yên trong 1 phút, giũ sạch nước rửa, vỗ khô trên giấy thấm, rửa lại tấm 4 lần (bạn cũng có thể dùng máy giặt để nhấn Hướng dẫn giặt bảng).

9. Phát triển màu sắc: thêm 50μL dung dịch dành cho nhà phát triển A vào mỗi giếng, sau đó thêm 50μL dung dịch dành cho nhà phát triển B, trộn trong 30 giây bằng máy trộn dạng đĩa (hoặc lắc nhẹ trong 30 giây bằng tay) và tránh hiện tượng phát màu ở 37oC trong 15 phút.

10. Chấm dứt: Tháo tấm dán nhãn enzyme và thêm 50μL dung dịch dừng vào từng giếng để dừng phản ứng (màu chuyển từ xanh sang vàng)

11. Xác định: Đặt các lỗ trắng về 0 và trong vòng 15 phút sau khi kết thúc, đo độ hấp thụ (giá trị OD) của mỗi giếng ở bước sóng 450 nm.

12. Tính toán: Theo nồng độ của sản phẩm chuẩn và giá trị OD tương ứng, tính phương trình hồi quy tuyến tính của đường chuẩn, sau đó tính nồng độ mẫu tương ứng trên phương trình hồi quy theo giá trị OD của mẫu. Bạn cũng có thể sử dụng nhiều phần mềm ứng dụng khác nhau để tính toán. Nồng độ cuối cùng là nồng độ đo được thực tế nhân với hệ số pha loãng.

[Yêu cầu mẫu đối với bộ ELISA khỉ collagenase I (Collagenase I)]

1. Mẫu không thể chứa natri azide (NaN3) vì natri azide (NaN3) là chất ức chế peroxidase cải ngựa (HRP).

2. Mẫu vật phải được chiết càng sớm càng tốt sau khi thu thập. Việc chiết xuất phải được thực hiện theo tài liệu liên quan. Nếu thử nghiệm không thể được thực hiện ngay lập tức, mẫu thử có thể được bảo quản ở -20oC, nhưng nên tránh đóng băng và tan băng nhiều lần.

3. Mẫu phải được ly tâm hoàn toàn, không có hiện tượng tan máu và các hạt.

[Những lưu ý về Bộ ELISA Monkey Collagenase I]

1. Thí nghiệm được thực hiện theo đúng hướng dẫn và kết quả của thí nghiệm phải được xác định bằng cách đọc trên máy đọc vi đĩa.

2. Nếu tấm phủ có dán nhãn enzyme không được sử dụng hết sau khi mở thì phải cho vào túi kín và bổ sung chất hút ẩm ngay lập tức.

3. Khuyến nghị rằng tất cả các tiêu chuẩn, mẫu và mẫu trắng phải được kiểm tra trùng lặp và lấy giá trị trung bình để giảm sai số thực nghiệm.

4. Hãy nhớ rằng mẫu đã được pha loãng 5 lần. Kết quả tính toán được nhân với 5 để thu được nồng độ thực tế của mẫu.

5. Phạm vi định lượng của bộ sản phẩm này là 6,25-200ng / L. Nếu vượt quá phạm vi này, nó được tính từ phần mở rộng của đường cong tiêu chuẩn. Nó không được sử dụng cho kết quả định lượng chính xác. ), Nhân với hệ số pha loãng tổng cộng sẽ là nồng độ cuối cùng của mẫu.

6. Nếu màu quá nhạt, thời gian ủ chất nền có thể được kéo dài hợp lý.

7. Để tránh lây nhiễm chéo, các đầu tip, mẫu và mẫu trắng phải được thay thế bằng mẫu mới cho mỗi lần thêm; các thành phần phổ biến như dung dịch làm việc với enzyme, chất pha loãng mẫu và chất nền phải được đúc hẫng và chúng không được chạm vào vi giếng. ; Không sử dụng lại màng niêm phong.

8. Các bộ dụng cụ được sử dụng trong thời gian bảo hành và không được trộn lẫn các lô thuốc thử khác nhau.

9. Chất nền B nhạy cảm với ánh sáng và tránh tiếp xúc lâu với ánh sáng.

[Tóm tắt quy trình vận hành của Monkey Collagenase I ELISA Kit]

Chuẩn bị thuốc thử, mẫu và chất chuẩn

Thêm mẫu và chất chuẩn đã chuẩn bị và phản ứng ở 37oC trong 30 phút

Rửa đĩa 4 lần, thêm thuốc thử enzyme và phản ứng ở 37oC trong 30 phút

Rửa đĩa 4 lần, thêm dung dịch phát triển màu A và B và phát triển ở 37oC trong 15 phút

Thêm giải pháp dừng

Đọc giá trị OD trong vòng 15 phút

Tính toán

[Phạm vi phát hiện bộ ELISA của Monkey Collagenase I (Collagenase I)]

Xin vui lòng hỏi

【Thông số kỹ thuật của Monkey Collagenase I ELISA Kit】

96 phần ăn/hộp 48 phần ăn/hộp

[Bảo quản Bộ ELISA Monkey Collagenase I]

Bảo quản ở nhiệt độ 2-8oC, tránh ánh sáng và ẩm.

[Hiệu lực của Bộ ELISA Monkey Collagenase I]

6 tháng